Biologie moléculaire et virus
Vectorologie & biologie moléculaire
RESPONSABLE DE SERVICE
Le service vectorologie et biologie moléculaire propose la construction de plasmides à façon et la conception, production et purification de vecteurs viraux, notamment vecteurs lentiviraux, rétroviraux et adéno-associés.
CLONAGE
Le service possède une collection de ‘backbones’ plasmidiques et réalise la construction de plasmides pour tous type d’expériences : expression en E.coli (différentes étiquettes, gènes de résistance, origines de replication), en baculovirus (différentes étiquettes, expression de complexes protéiques), en cellules de mammifère, mutagénèse, analyses CRISPR (plasmides Cas9 + 1-4 gRNAs, plasmides de recombinaison homologue), RNA interférence, construction de vecteurs viraux.
VECTEURS VIRAUX
Le service prend en charge la production de vecteurs viraux depuis la construction du plasmide d’expression à la production, purification et titration des particules virales : les vecteurs lentiviraux sont produit à concentrations jusqu’à 109TU/ml pour l’utilisation dans cellules non-transfectables, la création de lignées cellulaires stables, pour criblages CRISPR à haut débit ; les vecteurs Adéno-associés de différents sérotypes sont produits à des concentrations jusqu’à 1013 GC/ml et utilisés in vivo dans la souris pour la surexpression, l’inactivation (sh, miRNA, knock-out CRISPR) ou la modification de gènes.