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Trois trieurs haute vitesse à configuration optique diverse

Trois trieurs à haute vitesse sont à disposition des utilisateurs. Ces derniers permettent de collecter 4 populations simultanément ainsi que de cloner en plaques 96 ou 384 puits. Il est également possible de trier sous enceinte stérile.

ARIA II SORP

5 lasers : 355 nm, 405 nm, 488 nm, 561 nm, 633 nm.

15 paramètres

Module de clonage

BioRad S3

2 lasers : 488 nm, 561 nm.

4 paramètres

 

 

 

 

 

 

Aria FUSION

L’ARIA FUSION est placé sous une hotte à flux laminaire et permet ainsi de réaliser des tris stériles tout en assurant une protection tant pour les utilisateurs que pour les échantillons.

4 lasers : 405 nm, 488 nm, 561 nm, 633 nm.

16 paramètres

Module de clonage

Tri stérile sous hotte Bioprotect IV

Contact

Pour réaliser une demande de prestation, il vous suffit de remplir le formulaire ci-dessous et de nous l'envoyer à l'adresse groupe-tricel@igbmc.fr.

Formulaire de contact

Vitesse de tri

Combien de temps me faut-il pour trier ?

  • Pour la plupart des cellules primaires : On utilisera une buse de 70 µm et la vitesse moyenne de tri est de 50 x 106 cellules par heure.   
  • Pour les lignées cellulaires en culture : il faudra utiliser une buse de 100µm. La vitesse moyenne de tri sera donc de 10 x 106 cellules par heure.   

 

Exemple :

Si vous voulez trier une population exprimée à 5% par l’échantillon au départ, la viabilité étant de 90%, vous aimeriez récupérer plus de 106 cellules, il faudra avoir 40 x106 cellules au départ et le tri durera environ 2 heures minimum.
Il faut également rajouter dans tous les cas 45 minutes supplémentaires pour le temps de préparation de la machine et les temps de lavage.

A noter :

4 populations distinctes peuvent être récupérées en même temps sur les trieurs Becton Dickinson.
2 populations distinctes peuvent être récupérées avec le trieur Bio-rad.


N.B Il est impératif de filtrer tout échantillon avant tri !

Informations pour le tri cellulaire

Contrôles nécessaires pour un tri

  1. Contrôle de cellules non marquées :
  2. Contrôle Négatif
  3. Contrôles de compensation si nécessaire

Echantillon de tri

Amener les échantillons dans des tubes 12 x 75 mm stériles avec bouchon (tubes polypropylene or polystyrene), Eppendorf ou Falcon 15ml avec maximum de 5% serum.
Un volume de 500µL est suffisant pour les contrôles, avec un minimum de 300,000 cellules.

Les échantillons sont à resuspendre à une concentration de 10-50 x106 cellules/ml.

Tubes de récolte de cellules

(4 populations distinctes peuvent être récupérées en même temps)
Pour chaque tube, remplir au ¼ avec le milieu de récupération adéquat.
Vous pouvez utiliser des tubes de 12x75mm, Eppendorf ou Falcon 15 ml.

Les cellules triées avec une buse de 70 microns sont à une concentration ~106 cellules/ml.
Les cellules triées avec une buse de 1000 microns sont à une concentration ~250,000 cellules/ml.
Pensez à ramener suffisamment de tubes de collection pour chaque population.

Après le Tri

Pour optimiser le rendement cellulaire, remplissez les tubes de collection et centrifuger.